1945年,游学归来的刑侦专家程慈航,在码头遭遇险情,多方势力为争夺一只铁箱大开杀戒。这只铁箱里,存放着日军细菌武器的绝密档案。警察厅厅长莫采石将铁箱存放在档案馆密室内。由于内奸刘阿常的出卖,档案被盗,案情从此扑朔迷离。程慈航获悉此案事关日军细菌武器,向“叔叔”莫采石请战,总署刑侦警察局局长霍然随即特聘程慈航为布衣侦探。程慈航上任后,很快找到蛛丝马迹,顺藤摸瓜接连捕获重大线索,然而他却处处受阻。程慈航既要面对刑侦处处长严达庆的百般阻挠,又要揣测莫采石的讳深莫测,还要与他的老同学、对绝密档案觎觊已久的哈金斯斗智斗勇,更要与日本间谍博弈较量。内贼刘阿常的死,留下关键线索,矛头直指莫采石。恋人的牺牲,使程慈航爱恨交加,更加坚定信念一查到底。最终五九档案作为日本军国主义的侵略罪证,公诸天下,正义得到了伸张。